Υδρόλυση της μικροκυστίνης-RR (MC-RR) και προσδιορισμός των 
αμινοξέων της για τη μελέτη του μηχανισμού οξείδωσης 
μικροκυστινών

Καράμπελα, Ευσταθία; Karampela, Efstathia

dc.contributor.author	Καράμπελα, Ευσταθία	el
dc.contributor.author	Karampela, Efstathia	en
dc.date.accessioned	2022-09-07T09:01:11Z
dc.date.available	2022-09-07T09:01:11Z
dc.identifier.uri	https://dspace.lib.ntua.gr/xmlui/handle/123456789/55613
dc.identifier.uri	http://dx.doi.org/10.26240/heal.ntua.23311
dc.rights	Αναφορά Δημιουργού - Μη Εμπορική Χρήση - Παρόμοια Διανομή 3.0 Ελλάδα	*
dc.rights.uri	http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/gr/	*
dc.subject	Μικροκυστίνες	el
dc.subject	Αμινοξέα	el
dc.subject	Υδρόλυση	el
dc.subject	Υγροχρωματογραφία	el
dc.subject	Φασματομετρία	el
dc.subject	Microcystins	en
dc.subject	Amino acids	el
dc.subject	Hydrolysis	el
dc.subject	Liquid chromatography	el
dc.subject	Mass spectrometry	el
dc.title	Υδρόλυση της μικροκυστίνης-RR (MC-RR) και προσδιορισμός των αμινοξέων της για τη μελέτη του μηχανισμού οξείδωσης μικροκυστινών	el
dc.contributor.department	Τομέας Χημικών Επιστημών σε συνεργασία με το εργαστήριο «Καταλυτικών – Φωτοκαταλυτικών Διεργασιών και Περιβαλλοντικής Χημείας» στο Ινστιτούτο Νανοεπιστήμης - Νανοτεχνολογίας του ΕΚΕΦΕ Δημόκριτος	el
heal.type	bachelorThesis
heal.classification	Χημεία	el
heal.classification	Περιβάλλον	el
heal.language	el
heal.access	free
heal.recordProvider	ntua	el
heal.publicationDate	2022-02-21
heal.abstract	Τις τελευταίες δεκαετίες, η επιβάρυνση του περιβάλλοντος συνέβαλε στο φαινόμενο των μαζικών ανθήσεων των κυανοβακτηρίων στους υδάτινους πόρους. Οι κυανοτοξίνες αποτελούν δευτερογενείς μεταβολίτες των κυανοβακτηρίων και η αυξημένη παρουσία τους στα οικοσυστήματα έχει συνδεθεί με περιστατικά ασθενειών και θανάτων σε ζώα. Μία κατηγορία κυανοτοξινών είναι οι μικροκυστίνες. Πρόκειται για μονοκυκλικά επταπεπτίδια με ηπατοτοξική δράση, για τα οποία έχουν τεθεί όρια συγκέντρωσης στο πόσιμο νερό. Στους τρόπους αποικοδόμησης των μικροκυστινών συμπεριλαμβάνονται οι συμβατικές και προχωρημένες μέθοδοι οξείδωσης. Η παρούσα εργασία είχε ως στόχο α) την ανάπτυξη μίας μεθόδου υγροχρωματογραφίας σε συνδυασμό με μία αναλυτική τεχνική για χρήση σε υδρολυμένα μόρια μικροκυστινών και β) την ανάπτυξη μίας μεθόδου υδρόλυσης και την εφαρμογή της στη μικροκυστίνη-RR (MC-RR). Διασπώντας την μικροκυστίνη στα αμινοξέα της και παρακολουθώντας τις μεταβολές της συγκέντρωσής τους επιχειρείται ο εντοπισμός των περιοχών του μορίου που προσβάλλονται από τους οξειδωτικούς παράγοντες κατά την αποικοδόμησή. Έγινε σύγκριση δύο τεχνικών προσδιορισμού αμινοξέων: της υγροχρωματογραφίας σε συνδυασμό με α) την φθορισμομετρία (LC-FL) και β) την φασματομετρία μαζών σε σειρά (LC-MS/MS). Στην περίπτωση της φθορισμομετρίας χρησιμοποιήθηκε στήλη αντίστροφης φάσης και ρυθμιστικό διάλυμα οξικού αμμωνίου (CH3COONH4) με pH=4 παρουσία ακετονιτριλίου (ACN), ως κινητή φάση. Τα δείγματα προς ανάλυση υπόκεινταν σε διαδικασία παραγωγοποίησης με αντιδραστήριο το φθορενυλομεθυλοξυκαρβονυλοχλωρίδιο (FMOC-Cl). Για την φασματομετρία μαζών χρησιμοποιήθηκε στήλη ιοντοανταλλαγής και τα διαλύματα φορμικό αμμώνιο (HCOONH4) και ACN, 0.5% φορμικό οξύ (HCOOH) ως κινητή φάση. Η ανίχνευση των αμινοξέων έγινε με επιλεκτική παρακολούθηση των αντιδράσεων θραυσματοποίησης ιόντων αφού πρώτα πραγματοποιήθηκε βελτιστοποίηση της μεθόδου και βρέθηκαν οι μεταπτώσεις των ιόντων των αμινοξέων. Οι δύο τεχνικές εμφάνισαν παρόμοια γραμμικότητα αλλά η φθορισμομετρία αποδείχτηκε ακατάλληλη για την ανίχνευση ορισμένων αμινοξέων. Τα όρια ανίχνευσης και ποσοτικοποίησης ήταν 0.0019-0.0086 mg/L και 0.0058-0.026 mg/L αντίστοιχα για τη μέθοδο LC-FL ενώ ήταν 0.050-0.097 mg/L, 0.15-0.29 mg/L αντίστοιχα για τη μέθοδο LC-MS/MS. Έτσι, η LC-MS/MS επιλέχθηκε ως η αποτελεσματικότερη, περισσότερο αξιόπιστη και γρήγορη μέθοδος και χρησιμοποιήθηκε στη συνέχεια για την ανάλυση των δειγμάτων των μικροκυστινών μετά την υδρόλυση. Αποδείχτηκε πως τα αμινοξέα παραμένουν σταθερά κατά 77-93 % στις συνθήκες υδρόλυσης που εφαρμόστηκαν. Η MC-RR υδρολύθηκε με επιτυχία, ωστόσο η συγκέντρωση των αμινοξέων που ανιχνεύτηκε ήταν υψηλότερη της αναμενόμενης, γεγονός που αποδίδεται σε επιμόλυνση των δειγμάτων.	el
heal.advisorName	Τσόπελας, Φώτιος	el
heal.committeeMemberName	Τσόπελας, Φώτιος	el
heal.committeeMemberName	Βουγιούκα, Σταματίνα	el
heal.committeeMemberName	Κόλλια, Κωνσταντίνα	el
heal.academicPublisher	Εθνικό Μετσόβιο Πολυτεχνείο. Σχολή Χημικών Μηχανικών	el
heal.academicPublisherID	ntua
heal.numberOfPages	87 σ.	el
heal.fullTextAvailability	false