Μέτρηση του πάχους της μεμβράνης των ερυθροκυττάρων ανθρώπινου αίματος με την τεχνική της μικροσκοπίας ατομικής δύναμης

Abstract

Στην παρούσα διπλωματική εγασία έγινε μέτρηση του πάχους της μεμβράνης ερυθροκυττάρων ανθρώπινου αίματος με την τεχνική της μικροσκοπίας ατομικής δύναμης. Το αίμα που χρησιμοποιήθηκε προερχόταν από 3 υγιείς δότες. Η διαδικασία περιελάμβανε επίστρωση γυάλινων πλακιδίων με ένα μονοστρωματικό υμένιο κυττάρων αίματος και στη συνέχεια εμβάπτισή τους σε λουτρό υπότονου, υπέρτονου ή ισότονου διαλύματος για διάφορους χρόνους, ώστε να επέλθει λύση με οσμωτική καταπληξία. Έπειτα, τα πλακίδια με τις απομένουσες μεμβράνες τοποθετούνταν στο μικροσκόπιο ατομικής δύναμης προς μελέτη. Το μικροσκόπιο ατομικής δύναμης σαρώνοντας την επιφάνεια του δείγματος, πληροφορούσε με ακρίβεια νανομέτρου για το πάχος της μεμβράνης, η μέση τιμή του οποίου, έπειτα από στατιστική ανάλυση, υπολογίστηκε μεταξύ 5+-0,7 nm και 8,6+-2,6 nm.

In this diploma thesis we tried to assess the thickness of the red blood cell membrane of human blood through the Atomic Force Microscopy. Blood of 3 healthy donors was used. The procedure included the preparation of blood cells monolayer on glass plates and immersion in hypertonic, hypotonic or isotonic solution for different time durations, so that the cells were haemolysed through osmotic shock. Then, the plates with the cell ghosts were placed on the atomic force microsope. The atomic force microsope after scanning the surface of the sample informed us about the membrane thickness with accuracy of nanometeres. After statistic analysis we assessed a mean thickness that ranges between 5+-0.7 nm and 8.6+-2.6 nm.